基本信息
DH10Bac是昆蟲桿狀病毒Bac-to-Bac系統中常用的同源重組大腸桿菌菌株。該菌株含有桿狀病毒穿梭載體(baculovirus shuttle vector) bMON14272(俗稱bacmid,其含有一個轉座反應必須的mini-attTn7重組位點)和一個輔助質粒pMON7124(用于表達轉座所需的轉座蛋白)。DH10Bac主要用作pFastBac等類似載體轉化的宿主菌株。當pFastBac重組質粒轉化進入DH10Bac細胞后,pFastBac載體上的mini-Tn7位點和DH10Bac宿主菌中bacmid上的mini-attTn7位點之間發生轉座(transposition),產生重組的bacmid。重組的bacmid在轉染昆蟲細胞后可產生含有重組子的桿狀病毒,后者進一步感染昆蟲細胞后即可啟動外源重組蛋白的表達。 DH10Bac宿主包含的bacmid bMON14272含小型F復制子,卡那霉素抗性基因,mini-attTn7位點和lacZα互補因子(可通過藍白斑篩選);輔助質粒pMON7124包含四環素抗性和tnsABCD區域,該區域表達轉座反應所需的轉座蛋白。攜帶T7轉座原件(Tn7 element)的供體質粒pFastBac (donor pFastBac plasmid)帶有慶大霉素抗性基因,桿狀病毒多角體啟動子,多克隆位點區域和SV40的多腺苷酸化信號。