菌株簡介
EGY48菌株是Clontech公司開發的LexA 系統酵母雙雜實驗用菌株,MATa型,可直接轉化質粒進行蛋白互作驗證或篩庫試驗;Transformation marker為: his3, trp1, ura3,報告基因為:LEU2;報告基因UAS(上游激活序列)來源于LexA op(x6),只有當Bait和Prey互作時才能啟動LEU2表達 。EGY48-LexA酵母雙雜系統系統需要三種質粒配套使用:pLexA、pB42AD、p8op-LacZ。質粒pLexA的篩選標志為HIS3,用于表達DNA-BD(來自原核的202個氨基酸殘基組成的LexA蛋白)與目標蛋白(Bait)的融合蛋白;質粒pB42AD的篩選標志為TRP1,用于表達AD(來自皰疹病毒的88個氨基酸殘基組成的B42AD蛋白)與目標蛋白(Prey)的融合蛋白;報告質粒p8op-LacZ的篩選標志為URA3,報告基因為LacZ,報告基因UAS來源于LexA op(x8) ,只有當Bait和Prey互作時才能啟動LacZ表達。EGY48菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養,然后用30%甘油保藏菌種。