F-ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm rne131 (DE3)pLysS (CamR)
基本信息
BL21 Star (DE3)pLysS菌株來源于BL21 (DE3)，含有rne131突變(RNaseE基因突變)，RNaseE基因的突變降低了內源RNase的積累，增強了菌株細胞內mRNA的穩定性，從而提高了異源蛋白的表達水平。 BL21(DE3)是BL21被λ噬菌體DE3溶原化(lysogenization)的衍生菌株，在lacUV5啟動子控制下可表達噬菌體T7 RNA聚合酶(相關基因序列已經整合到細菌染色體中)。IPTG可以誘導BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的高表達，因此BL21(DE3)菌株適合受T7啟動子(T7 promoter)調控的目的基因通過IPTG誘導表達。常見的pET系列原核表達載體中目的基因的表達都是受T7啟動子調控的，因此都適合用BL21(DE3)作為宿主菌。 BL21 Star (DE3)pLysS菌株在BL21(DE3)基礎上改造而成，主要適用于T7啟動子表達載體(如pET系列)的高水平蛋白表達，同時含有大腸桿菌RNA聚合酶。 BL21(DE3)pLysS菌株攜帶pLysS，具有氯霉素抗性，可以表達能抑制T7 RNA聚合酶的T7溶菌酶(T7 lysozyme)，從而可以抑制T7 RNA聚合酶在目的蛋白被IPTG誘導前的本底表達，即導致本底性的外源重組蛋白的表達被有效抑制。這種情況下特別適合于影響細胞生存和活力的外源毒性蛋白的表達。
培養基
菌株簡介
BL21 Star (DE3)pLysS菌株與BL21(DE3)pLysS相比，含有rne131突變(RNaseE基因突變)，導致細胞內RNaseE缺少，細胞內mRNA穩定性提高，從而可以實現異源蛋白的高表達。BL21 Star (DE3)pLysS菌株主要適用于T7啟動子表達載體(如pET系列)的高水平蛋白表達，同時含有大腸桿菌RNA聚合酶，也可用于非T7啟動子表達載體(pGEX、pMAL等)的蛋白表達。由于BL21 Star (DE3)菌株的異源基因基礎表達水平較高，所以不適合毒性蛋白的表達。BL21 Star (DE3)pLysS菌株攜帶pLysS，具有氯霉素抗性。pLysS含有表達T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可與T7 RNA聚合酶結合抑制其轉錄活性，進而降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG誘導的蛋白表達。pLysS質粒含有p15A復制起始子，可以和含有pUC或pBR322等復制起始子的質粒兼容。本菌株可以使用常規的2YT或LB培養基進行培養。
