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永生化小鼠少突膠質前體細胞

永生化小鼠少突膠質前體細胞采用酶解法和基因轉染制備而來

HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。

永生化小鼠少突膠質前體細胞完全培養基

少突膠質前體細胞（OPCs）是中樞神經系統中形成髓鞘的主要細胞的前體，它們分化為少突膠質細胞，負責包繞軸突形成絕緣的髓鞘結構。少突膠質前體細胞在發育中的中樞神經系統中廣泛遷移，并利用血管作為物理支架。它們與血管的關聯對其遷移至關重要。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構，這有助于協助生物電信號的跳躍式高效傳遞，并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變，還會引起神經元損傷或精神類疾病，甚至可以引發腦腫瘤。此外，有研究表明，內皮細胞在腦發育過程中通過STING信號調節少突膠質前體細胞的應答，進而影響少突膠質細胞的生成和髓鞘形成。這一發現揭示了血管系統在調節少突膠質細胞發生中的重要作用機制。

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。